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技術(shù)文章

一分鐘了解為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法

點(diǎn)擊次數(shù)：17019   發(fā)布時(shí)間：2021/12/1 15:19:23

在日常實(shí)驗(yàn)沖，常用的elisa方法為雙抗夾心法，但是也有客戶問道為什么有的試劑盒采用的是競(jìng)爭(zhēng)Elisa方法，因?yàn)?/span>小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，*后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。
上海極威生物在此提醒大家，要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)方案選擇相對(duì)應(yīng)的方法，不同的實(shí)驗(yàn)方案應(yīng)該選用不同的檢測(cè)方法，極威生物也可以進(jìn)行代測(cè)技術(shù)服務(wù)。
細(xì)胞PKC激酶活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒介紹
注意事項(xiàng)
 
1． 本產(chǎn)品為25次操作，包括背景操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 系統(tǒng)操作過程中，背景測(cè)定只需1次
4． 樣品處理忌用磷酸緩沖溶液
5． 樣品須澄清，至關(guān)重要 
6． 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻光譜測(cè)定
7． 測(cè)定值由高到低變化；測(cè)定可持續(xù)30分鐘
8． 光譜測(cè)定后，比色皿須清洗徹底
9． 樣本測(cè)定0分鐘讀數(shù)高于5分鐘讀數(shù)表明具有酶活性
10． 建議待測(cè)樣本蛋白濃度為50微克/5微升（本公司提供  Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）
11． 如果待測(cè)樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度
12． 可以使用PKC抑制劑作為抑制劑對(duì)照（IC50＝150納摩爾）或陰性對(duì)照
13． 蛋白激酶C活性單位濃度定義：在30℃溫度下，pH 7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）所需的酶量作為一個(gè)活性單位
14． 本公司提供系列蛋白激酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品

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