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點擊次數(shù)：1011 發(fā)布時間：2021/6/28 10:53:07
B103大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞
Catalogue No.: C1586
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：貼壁
Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells ａnd cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
| Item | Specifications |
| a T25 flask | 2X106 |
| Manual | 1 copy |
Operation steps for cell culture
1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；
2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；
4. 將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
Tips：
1. 細胞經(jīng)過運輸后，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正�，F(xiàn)象。貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。
2. 細胞生長不均時，可以將細胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。
3. 細胞生長緩慢時，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（不超過20%），也可以根據(jù)細胞生長狀態(tài)，選擇傳代細胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 不同細胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準，嚴禁消化到細胞完全漂浮。客戶消化過度導致細胞死亡、漂浮、生長緩慢，不提供免費售后服務(wù)。
5. 干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復蘇一支，若復蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方不提供免費售后服務(wù)。
6. 細胞狀態(tài)正常時，應(yīng)盡快凍存細胞保種，凍存后應(yīng)隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責，客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務(wù)。
Notice：
客戶收到細胞有任何疑問請及時致電我們，細胞收到后1周內(nèi)沒有任何電話，或其他形式回訪，默認為細胞質(zhì)量沒問題，之后出了任何問題不給予免費售后。細胞免費售后只提供一次，若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費補發(fā)，細胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外。
尊敬的客戶：
您好！上海極威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。極威生物依托國內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢，由留美資深科學家與數(shù)位國內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立，在科學研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有極高的聲譽，經(jīng)過多年的努力發(fā)展已成為專業(yè)供應(yīng)各類生物科研用品的公司，長期專注于生物領(lǐng)域，旗下產(chǎn)品種類眾多。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本，以市場需求為導向，以為客戶創(chuàng)造價值為己任的精神，致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。力求為我國生物科技事業(yè)提供更好的、更專業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品。自公司成立以來，公司的銷售額保持高速增長，企業(yè)規(guī)模不斷擴大，研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒，生化試劑盒，動物血制品，抗體，標準品，生化試劑，實驗耗材等10萬余種類，公司長期致力于elisa試劑盒、生化試劑盒的研發(fā)，為客戶提供生化試劑盒、ELISA試劑盒、技術(shù)服務(wù)等一系列實驗代測服務(wù)。
實驗代做服務(wù)：酶聯(lián)免疫ELISA、生化測試、液相氣相檢測、Icp-MS測試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線粒體測序、熒光定量PCR、基因克隆、定點突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù)等,公司本著“質(zhì)量，專業(yè)服務(wù)”的原則，致力于為用戶提供高性價比的試劑盒和檢測服務(wù)。
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