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極威生物聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒2022年新品主要用途
聚乙二醇細(xì)胞融合試劑是一種旨在促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞合二為一的化學(xué)融合性介質(zhì)和權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用的細(xì)胞種類包括老鼠細(xì)胞株、人體細(xì)胞株、胚胎細(xì)胞株、腫瘤細(xì)胞株、懸浮細(xì)胞株、植物細(xì)胞株等。應(yīng)用于融合雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生抗體,腫瘤細(xì)胞和人體樹突狀細(xì)胞融合產(chǎn)生免疫細(xì)胞,以及人鼠細(xì)胞融合產(chǎn)生染色體單體等。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,細(xì)胞低毒性,融合效率高。
極威生物聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒2022年新品技術(shù)背景
作為化學(xué)融合劑的聚乙二醇(polyethylene glycol),其特定的分子量能夠使細(xì)胞間或囊泡間脫水而造成細(xì)胞與細(xì)胞的緊密接觸,促使細(xì)胞膜粘合一起。聚乙二醇對細(xì)胞廣譜低毒性。它被證實(shí)是一種有效的代替病毒(Sendai)的融合劑,已成功用于植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞以及生殖細(xì)胞的融合。
極威生物聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒2022年新品產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A)毫升
融合液(Reagent B)毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細(xì)胞脫離
完全細(xì)胞培養(yǎng)液(G&VS12052):用于細(xì)胞培養(yǎng)
50毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
臺式離心機(jī):用于樣品操作
75 cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶:用于融合細(xì)胞篩選和培養(yǎng)的容器
實(shí)驗(yàn)步驟
在實(shí)施細(xì)胞融合前,要選擇好兩個(gè)帶有篩選標(biāo)記的父代細(xì)胞株,例如一個(gè)帶有HPRT缺陷型(G&VS10004試劑盒)且抗生素抗性的,另一個(gè)反之。存活的細(xì)胞雜合子具有HPRT和抗生素抗性。當(dāng)開始下列操作之前,先將清理液(Reagent A)、融合液(Reagent B)、用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液放進(jìn)37℃恒溫水槽預(yù)熱。然后開始下列操作。
1. 在融合操作前24小時(shí),將兩個(gè)75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里的父代細(xì)胞用胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脫離傳代一次(注意:此步驟非常重要)
2. 次日,分別抽掉兩個(gè)待融合的父代細(xì)胞培養(yǎng)瓶里(75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶)的培養(yǎng)液
3. 分別加入xx毫升 清理液(Reagent A),清洗生長中的細(xì)胞表面
4. 分別抽掉5毫升清洗液
5. 分別加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面
6. 置入37℃培養(yǎng)箱3分種
7. 用手震動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落,然后分別加入xx毫升清理液(Reagent A)
8. 充分混勻后,在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)
9. 分別加入4 x 106的兩個(gè)父代細(xì)胞合并到一個(gè)50毫升錐形離心管
10. 放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g
11. 小心抽去上清液
12. 加入xx毫升清理液(Reagent A)
13. 混勻后,放入臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g
14. 小心抽去上清液,用手指輕輕彈擊直至細(xì)胞顆粒群松散
15. 加入xx毫升融合液(Reagent B),充分混勻
16. 置于室溫下1分鐘
17. 加入xx毫升清理液(Reagent A)
18. 輕輕混勻后,放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300 g
19. 小心抽去上清液
20. 加入用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8毫升,充分混勻
21. 移入1毫升到1個(gè)75 cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里(內(nèi)加20毫升完全細(xì)胞培養(yǎng)液)
各2毫升分別到2個(gè)75 cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里(每個(gè)內(nèi)加20毫升完全細(xì)胞培養(yǎng)液)
5毫升到1個(gè)75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里(內(nèi)加20毫升完全細(xì)胞培養(yǎng)液)
22. (選擇步驟)如果需要,可以分別移入96孔培養(yǎng)板(每孔200微升)
23. 放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱
24. 24小時(shí)后開始細(xì)胞篩選,直至獲得融合雜合子細(xì)胞克。10至14天)
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為10次操作
2. 建議嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作,特別是融合液(Reagent B)與細(xì)胞混勻孵育時(shí),嚴(yán)格控制孵育時(shí)間,避免聚乙二醇的細(xì)胞毒性作用,而影響融合效果
3. 所有凍存融合操作和使用工具均須在嚴(yán)格無菌狀態(tài)下進(jìn)行
4. 融合操作前,務(wù)必使待融合細(xì)胞進(jìn)行胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脫離傳代一次
5. 本公司提供 DMEM完全細(xì)胞培養(yǎng)液(G&VS12052)
6. 細(xì)胞篩選,通常10天后,出現(xiàn)存活的細(xì)胞克;采用96孔板可以獲得無數(shù)單一克隆
7. 本公司提供系列細(xì)胞技術(shù)試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無病毒和支原體污染
3. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定能使植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、人體細(xì)胞、人鼠細(xì)胞等融合成功率高達(dá)95%,可獲得數(shù)百個(gè)雜合體細(xì)胞
使用承諾
極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量承諾”的宗旨為我們的用戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
編號名稱規(guī)格
G&VS10002.1聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒10次
G&VS10002.1A清理液(Reagent A)毫升
G&VS10002.1B融合液(Reagent B)毫升
G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升
G&VS12052 DMEM完全細(xì)胞培養(yǎng)基毫升
產(chǎn)品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
G&VS10002.1 | 聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒 | 10次 |
G&VS10002.2 | 電擊法細(xì)胞融合試劑盒 | 10次 |
G&VS10003 | 甲基纖維素細(xì)胞克隆試劑盒 | 10/50/80次 |
G&VS10024 | 軟瓊脂細(xì)胞克隆試劑盒 | 10/20次 |
G&VS10011.1 | 藍(lán)色熒光染色體核型分析試劑盒 | 100次 |
G&VS10035 | 免疫熒光細(xì)胞流式儀分析試劑盒 | 10次 |
更新時(shí)間:2024/12/17 15:06:06
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